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8-28
鬼峰來源很多,其中主要來源于流動相和管路,如:有機相中污染物,水相中污染物,緩沖鹽,流動相瓶和混合過程產(chǎn)生等等。在液相色譜分析中,幾乎不可避免鬼峰的干擾,尤其在使用了緩沖鹽或者酸性添加劑并進行梯度分析時,更易出現(xiàn)鬼峰從而干擾微量或者痕量物質(zhì)的分離或者定量。方法開發(fā)中一旦出現(xiàn)鬼峰,消除鬼峰則需要花費分析人員較多的時間和精力,也是一項非常棘手的工作。鬼峰捕集小柱可以持續(xù)有效吸附流動相中的雜質(zhì),從而縮短了方法驗證和雜質(zhì)分析的時間。反相色譜梯度分析時,將小柱安裝在梯度混合器和自動進樣...
8-22
PuroSpherSTAR色譜柱的技術(shù)主要包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)沒有想象中那么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,需要經(jīng)驗積累。一般情況下,正相反相柱應(yīng)該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖,不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉,反沖后還是正著用比較好,以免柱子的兩頭都被污染。建議正向使用,反向沖洗。PuroSpherS...
8-14
高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金。取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了...
7-29
固相萃取就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取具有如下優(yōu)點:(1)高的回收率和高的富集倍數(shù)。大多數(shù)固相萃取體系的回收率較高,可達70%~100%;另外,固相萃取的富集倍數(shù)一般很高,很多體系很容易就能達到幾百倍,少數(shù)體系甚至能達到幾千或幾萬倍,這是一般傳統(tǒng)分離富集方法很難達到的。(2)使用的高純有毒有機溶劑量很少,減少了對環(huán)境的污染,是一種對環(huán)境友好的分離富集方法;另...
7-23
賽默飛色譜柱選擇時要掌握色譜柱的主要關(guān)鍵參數(shù),色譜柱的保護,色譜分析理論以及色譜柱的分類等知識,分析工作者才能做到在工作開展時一針見血的選擇色譜柱,有的放失的開發(fā)方法,后心中有數(shù)的完成分析工作。賽默飛色譜柱的關(guān)鍵參數(shù)有固定相、內(nèi)徑,長度和液膜的厚度。1)固定相固定相由固體吸附劑或涂有固定液的擔(dān)體構(gòu)成。擔(dān)體是一種多孔性化學(xué)惰性固體,用來支撐固定液。擔(dān)體的特性是表面積大、有化學(xué)惰性、熱穩(wěn)定性,孔隙結(jié)構(gòu)和浸潤性。擔(dān)體分為一般分硅藻土和非硅藻土兩大類。固定相一般是具有活性的多孔性固體...
7-14
在高效液相色譜分析系統(tǒng)中,對溫度控制的要求越來越高,藥典及諸多新的分析方法,也對柱溫給出條件,由于恒溫箱可以精確、穩(wěn)定的控制使用溫度,對于提高柱效。使Acclaim色譜柱成為高效液相色譜儀的重要配套裝置。以高純度具有良好穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì),通過嚴(yán)格控制單分子層形成以及封尾的化學(xué)反應(yīng)條件,可確保柱與柱之間有著可靠的重現(xiàn)性。該填料為均一的球形顆粒,通過運用的勻漿裝填技術(shù)裝填得到的色譜柱,柱床密度均一穩(wěn)定,可保證具有的柱效。Acclaim色譜柱使用的三個使用要點:1.Acclaim...
6-29
免疫親和柱是利用抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原抗體的高選擇性,從復(fù)雜的待測樣品中提取目標(biāo)化合物。免疫親和層析常見的用途是純化重組蛋白。免疫親和層析是從粗混合物中純化蛋白質(zhì)或核酸理想選擇。如果蛋白質(zhì)的分子量,疏水性,電荷等未知,親和色譜法仍可適用于這種情況。一個典型例子是嘗試分離具有特定活性的酶時,可以用與所選底物相似或相同的連接配體構(gòu)建親和柱。免疫親和柱的使用要點:1、上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;2、若樣品為復(fù)雜樣品,例如高蛋...
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